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DNA連接酶與DNA聚合酶的區(qū)別?

178 2023-02-17 22:02 儲(chǔ)新

DNA連接酶與DNA聚合酶的區(qū)別?

DNA聚合酶的作用是催化DNA的復(fù)制,即將原料脫氧核糖核苷酸 通過引物與模板鏈進(jìn)行配對(duì),合成新的DNA單鏈。DNA連接酶則是將兩段分開的DNA鏈通過特定末端連接在一起。

拓展資料

DNA聚合酶

DNA聚合酶(DNA polymerase)是細(xì)胞復(fù)制DNA的重要作用酶。DNA聚合酶 , 以DNA為復(fù)制模板,從將DNA由5'端點(diǎn)開始復(fù)制到3'端的酶。DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成(在具備模板、引物、dNTP等的情況下)及其相輔的活性。

dna聚合酶主要連接DNA片段與單個(gè)脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵,在DNA復(fù)制中起做用;DNA連接酶主要是連接DNA片段之間的磷酸二酯鍵,起連接作用.在基因工程中起作用,同時(shí)DNA連接酶在DNA復(fù)制中也起作用,比如崗琦片段的連接。

DNA連接酶:主要是連接dna片段之間的磷酸二酯鍵,起連接作用,在基因工程中起作用。

DNA聚合酶只能將單個(gè)核苷酸加到已有的核酸片段的3′末端的羥基上,形成磷酸二酯鍵;而DNA連接酶是在兩個(gè)DNA片段之間形成磷酸二酯鍵,不是在單個(gè)核苷酸與DNA片段之間形成磷酸二酯鍵。

DNA 連接酶是生物體內(nèi)重要的酶,其所催化的反應(yīng)在DNA 的復(fù)制和修復(fù)過程中起著重要的作用。DNA 連接酶分為兩大類:一類是利用ATP 的能量催化兩個(gè)核苷酸鏈之間形成磷酸二酯鍵的依賴ATP 的DNA 連接酶,另一類是利用煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+) 的能量催化兩個(gè)核苷酸鏈之間形成磷酸二酯鍵的依賴NAD* 的DNA 連接酶。

拓展資料:

DNA連接酶(DNA Ligase)也稱DNA黏合酶,在分子生物學(xué)中扮演一個(gè)既特殊又關(guān)鍵的角色,那就是連接DNA鏈3'-OH末端和,另一DNA鏈的5'-P末端,使二者生成磷酸二酯鍵,從而把兩段相鄰的DNA鏈連成完整的鏈。連接酶的催化作用需要消耗ATP。

polymerase又稱DNA聚合酶。系專司生物催化合成脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)的一類酶的統(tǒng)稱。1957年,美國(guó)科學(xué)家阿瑟?科恩伯格(Arthur?Kornberg)首次在大腸桿菌中發(fā)現(xiàn)DNA聚合酶,這種酶被稱為DNA聚合酶I(DNA?polymerase?I,簡(jiǎn)稱:Pol?I)。1970年,德國(guó)科學(xué)家羅爾夫?克尼佩爾斯(Rolf?Knippers)發(fā)現(xiàn)DNA聚合酶II(Pol?II)。隨后,DNA聚合酶III(Pol?III)被發(fā)現(xiàn)。原核生物中主要的DNA聚合酶及負(fù)責(zé)染色體復(fù)制的是Pol?III。

DNA聚合酶主要連接DNA片段與單個(gè)脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵,在DNA復(fù)制中起做用;DNA連接酶主要是連接DNA片段之間的磷酸二酯鍵,起連接作用.在基因工程中起作用,同時(shí)DNA連接酶在DNA復(fù)制中也起作用,比如崗琦片段的連接!

1.DNA聚合酶(DNA polymerase)是細(xì)胞復(fù)制DNA的重要作用酶。DNA聚合酶 , 以DNA為復(fù)制模板,從將DNA由5'端點(diǎn)開始復(fù)制到3'端的酶。DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成(在具備模板、引物、dNTP等的情況下)及其相輔的活性。

2.DNA連接酶,在分子生物學(xué)中扮演一個(gè)既特殊又關(guān)鍵的角色,那就是把兩條DNA黏合成一條。無論是雙股或是單股DNA的黏合,DNA黏合酶都可以借由形成磷酸雙脂鍵將DNA在3'端的尾端與5'端的前端連在一起。雖然在細(xì)胞內(nèi)也有其他的蛋白質(zhì),例如像是DNA聚合酶在其中一股DNA為模版的情況下,將另一邊的DNA單股斷裂端,透過聚合反應(yīng)的過程形成磷酸雙脂鍵(phosphodiester bond)來黏合DNA。但是DNA聚合酶的黏合過程卻只是聚合反應(yīng)一個(gè)附帶的功能而已,真正在細(xì)胞內(nèi)扮演DNA黏合反應(yīng)的工作還是以DNA黏合酶為主。

我記不太清了,好像是DNA聚合酶是用DNA解旋后恢復(fù)用的,而DNA連接酶是在基因工程中用的,用來連接磷酸二酯鍵的。

N好像答案不不對(duì)吧

這兩種酶都是用于連接磷酸二脂鍵的鏈接的

但是有啥區(qū)別就不知道了

連接酶主要在哪生有

連接酶就是將兩段核酸連接起來的酶,相當(dāng)于基因工程中的“糨糊”。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)幾種不同來源或作用于不同底物的連接酶。

1.T4 DNA 連接酶

T4 DNA連接酶的分子量為68kDa,催化DNA5'磷酸基與3'羥基之間形成磷酸二酯鍵。反應(yīng)底物為粘端、切口、平端的RNA(但效率低)或DNA。低濃度的聚乙二醇PEG(一般為10%)和單價(jià)陽離子(150-200mM NaCl)可以提高平端連接速率。

一般采用Weiss單位來衡量T4 DNA連接酶的活性。在37℃下20分鐘催化1 nmol 32p從焦磷酸根置換到[γ,β32P]ATP所需的酶量,定義為1個(gè)Weiss單位。該定義方法基于ATP和焦磷酸的交換,是最常用的連接酶單位,但該定義所展示的直觀生物學(xué)意義不顯著。New England Biolabs公司也提出了一種定義方式,通過粘性末端的連接效率來表示。即,在20μl反應(yīng)體系中于16℃,使HindⅢ切過的? DNA(300μg/ml,0.12μM 5' 末端)在30分鐘內(nèi)連接50%所需的酶量為1個(gè)NEB單位。1個(gè)NEB單位等于0.015 Weiss單位,1 Weiss 單位等于 67 NEB單位。連接反應(yīng)條件需要ATP,若在16℃反應(yīng),大約需4小時(shí);若在4℃反應(yīng),則需反應(yīng)過夜。

2.E.coli DNA 連接酶

與T4 DNA ligase活性相似,但需煙酰胺-腺嘌呤二核苷酸(NAD+)參與,且其平端連接效率低,常用于置換合成法合成cDNA。作cDNA克隆時(shí),不會(huì)將RNA連接到DNA,不連接RNA??捎糜贠kayama and Berg法克隆cDNA。

3.Taq DNA 連接酶

Taq DNA連接酶可在兩個(gè)寡核苷酸之間進(jìn)行連接反應(yīng),同時(shí)必須與另一DNA鏈形成雜交體,相當(dāng)于連接dsDNA中的缺口,作用在45℃~65℃,需NAD+??捎糜跈z測(cè)等位基因的變化以及在PCR擴(kuò)增中引入寡核苷酸。它不可替代T4 DNA ligase。

4.T4 RNA連接酶

T4 RNA連接酶可以催化單鏈DNA或RNA的5'-磷酸與另一單鏈DNA或RNA的3'羥基之間形成共價(jià)連接。在單鏈DNA或單鏈RNA的5'端磷酸基團(tuán)加上可連接帶3'羥基的DNA或RNA或單核苷酸pNp,因此T4 RNA 連接酶可用于標(biāo)記RNA的3'末端、單鏈DNA或RNA的連接、增強(qiáng)T4 DNA連接酶的連接活性以及合成寡核苷酸。

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