1. 電穿孔射頻美容儀真的能起到作用么

心臟射頻消融手術(shù)是有一定的危險，心臟的射頻消融手術(shù)主要是針對快速的心律失常，尤其是針對陣發(fā)性的室上性心動過速，還有陣發(fā)性心房顫以及進發(fā)性心房撲動等，最容易出現(xiàn)的風險，就是在射頻消融的過程中有可能會引起心臟的穿孔，如果發(fā)生穿孔，就有可能會導致心包填塞，患者就會出現(xiàn)心率過快，或者是血壓偏低等情況。

2. 電穿孔儀器原理與作用

叫電極絲

電火花穿孔機也稱電火花打孔機、電火花小孔機、電火花細孔放電機，其工作原理是利用連續(xù)上下垂直運動的細金屬銅管（稱為電極絲）作電極，對工件進行脈沖火花放電蝕除金屬成型

3. 電穿孔儀的使用方法

穿孔釘取下來的的具體操作步驟如下：

1、首先，將起釘器倒置在釘子上，然后將釘子夾緊。

2、其次，使用起釘器的底部作為支點，向后用力撬動釘子。

3、接著，用力拉回已撬開的鐵釘，直到拉出鐵釘。

4、最后，拉出鐵釘，用手直接撿起。

5、請注意將其妥善存放，不要刺穿

4. 電穿孔美容儀與射頻的區(qū)別

簡單說明：超聲波是最傳統(tǒng)基礎的導入產(chǎn)品的儀器，通過高頻率振蕩將產(chǎn)品導入到皮膚至吸收；電穿孔技術(shù)是近兩年新型的美容技術(shù)，可以將產(chǎn)品直接滲透到皮膚真皮層，滲透率是負離子導入的10-27倍，同時具有收緊的功效。（電穿孔技術(shù)主要應用在無針美塑儀中。部分儀器也會將其它技術(shù)如射頻、彩光、EMS相結(jié)合，效果更好）

前者在皮膚上使用時無明顯的感覺（通過在探頭上滴水珠跳動能看到在工作），后者在皮膚上使用會有電流麻麻的感覺（電流敏感者剛開始可能不適應）。如何選擇主要看你皮膚狀況，簡單的護理用超聲波就可以，若皮膚有些松馳、細紋用電穿孔美容儀效果更明顯…………希望能幫到你

5. 電穿孔導入儀作用是啥

生物通報道：轉(zhuǎn)染是將外源遺傳物質(zhì)導入真核細胞的過程，是細胞和分子生物學研究的重要工具，可用于研究基因表達對細胞生理水平的影響。不論是質(zhì)粒、DNA還是各種RNA（mRNA、siRNA或microRNA），要將這些外源核酸轉(zhuǎn)入細胞并不容易，它們必須穿過細胞膜這層屏障才能進入細胞質(zhì)。轉(zhuǎn)染方法可分為物理轉(zhuǎn)染和化學轉(zhuǎn)染，物理轉(zhuǎn)染方法包括電穿孔、顯微注射和基因槍等，化學轉(zhuǎn)染可使用磷酸鈣共沉淀、DEAE-Dx或基于陽離子脂質(zhì)的轉(zhuǎn)染試劑。

上述方法都可以解決轉(zhuǎn)染面臨的主要挑戰(zhàn)，即讓帶負電荷的核酸分子穿過帶負電的細胞膜。物理轉(zhuǎn)染方法一般是在細胞膜上打洞來克服靜電排斥，使核酸插入。而化學轉(zhuǎn)染中，一般是利用帶正電的轉(zhuǎn)染試劑將帶負電的核酸包裹起來。這些方法都可以實現(xiàn)轉(zhuǎn)染，可謂條條大路通羅馬，那么究竟是選瞬時轉(zhuǎn)染好還是選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染好呢？

瞬時轉(zhuǎn)染的細胞中，外源基因得以表達但它們并不會整合到細胞的基因組中，也就不會被復制。細胞中瞬時轉(zhuǎn)染的外源基因表達時間有限，通常僅持續(xù)幾天，直到外源基因在細胞分裂過程中因各種因素丟失為止

我們?nèi)绾螀^(qū)分細胞是否轉(zhuǎn)染成功了呢？在轉(zhuǎn)染質(zhì)粒中往往都含有一個報告基因，來指示細胞中目標基因是否存在，這樣的報告基因一般可以在轉(zhuǎn)染后一兩天內(nèi)檢測到。

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染可以在瞬時轉(zhuǎn)染的基礎上建立，只不過需要一個重要的偶發(fā)過程：在少數(shù)轉(zhuǎn)染細胞中，外源基因能夠整合到細胞的基因組中。外源基因成為細胞基因組的一部分從而得以復制，這就是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的標志。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的子代細胞也同樣表達外源基因，由此形成穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細胞系。

在建立上述穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞系時，我們需要使用選擇性標記來區(qū)分瞬時轉(zhuǎn)染與穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。將這些選擇性標記與基因共表達，我們就可以篩選出外源基因已成功整合到基因組的細胞，同時剔除瞬時轉(zhuǎn)染的細胞。將外源基因與抗生素抗性基因共轉(zhuǎn)染（如新霉素抗性基因neo）是一種常用方法，隨后可用相應抗生素（如geneticin或G418）對轉(zhuǎn)染后的細胞進行篩選。只有穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細胞才會獲得對抗生素的抗性，在長期培養(yǎng)中存活下來，由此實現(xiàn)對目標細胞的篩選和擴增。

孰優(yōu)孰劣？

選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染還是瞬時轉(zhuǎn)染呢？這要看我們打算進行長期研究還是短期實驗。瞬時轉(zhuǎn)染一般持續(xù)幾天，用瞬時轉(zhuǎn)染研究基因表達，通常在轉(zhuǎn)染后的24小時至96小時內(nèi)收獲細胞，其具體時間取決于細胞類型、載體構(gòu)建等多種因素。也正因如此，瞬時轉(zhuǎn)染一般用于研究基因或基因產(chǎn)物的短期表達，基因敲除或RNA介導的基因沉默，以及進行蛋白質(zhì)小規(guī)模合成。瞬時轉(zhuǎn)染mRNA比轉(zhuǎn)染傳統(tǒng)質(zhì)粒DNA出結(jié)果更快，這是因為mRNA能夠直接在核外表達，在一些系統(tǒng)中mRNA可以在轉(zhuǎn)染后幾分鐘就得到表達。

相應的，在需要進行長期基因表達時就得進行穩(wěn)定轉(zhuǎn)染，例如大規(guī)模蛋白合成、長期藥理學研究、基因治療研究和長期遺傳調(diào)控機制研究等等。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染與瞬時轉(zhuǎn)染相比，時間更長也更費勁，所以不到迫不得已一般不被選用。

以往對需要正確折疊和翻譯后修飾的重組蛋白進行大規(guī)模合成，只能使用穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細胞。但近年來瞬時轉(zhuǎn)染和細胞培養(yǎng)方法的進步改變了這一局面，經(jīng)過改良之后人們已經(jīng)可以通過對一些普遍使用的細胞系（如HEK293和CHO細胞）進行懸浮培養(yǎng)，來實現(xiàn)瞬時轉(zhuǎn)染的大規(guī)模重組蛋白合成。

建立穩(wěn)定表達的細胞系既麻煩又費勁，在合適的情況下選用瞬時表達可以省去不少精力。當然，在新的一年中轉(zhuǎn)染技術(shù)的新發(fā)展無疑會進一步改進瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染技術(shù)，使人們能夠更加有效的進行外源基因表達。

瞬轉(zhuǎn)和穩(wěn)轉(zhuǎn)最大的區(qū)別在于，細胞中很多蛋白的功能是互補型的，穩(wěn)轉(zhuǎn)由于篩選時間過長，往往細胞為適應變化，會激活一些備用的互補機制，以彌補功能的缺陷，從而削弱一些表型；此外，即使有一些表型，往往不能分析是信號多個節(jié)點發(fā)生改變后的效應（時間長，很多基因都可能會相應變化），還是靶蛋白本身的效應；即到底是單一作用，還是多點變化后的整體效應。瞬轉(zhuǎn)由于時間較短，往往細胞還不能完全適應，相對容易反映一些表層變化，并非很多信號級聯(lián)后的整體效應。

其次，某些功能非常重要的基因，諸如我研究的蛋白掌握真核生物75%基因的表達，穩(wěn)轉(zhuǎn)無法實現(xiàn)——致死，甚至其上的抑制蛋白KD也致死，對于這類基因，唯一能做的就是瞬轉(zhuǎn)，當大部分靶蛋白被KD以后，少量的殘余蛋白能夠勉強維持生命但不能完全滿足細胞生長的，這時候就會有細胞表型。

瞬轉(zhuǎn)的弱點在于不能達到100%的效率，如果侵染效率不高，將很難獲得有效的表型；若想進一步進行過表達或KD另外的基因等，基本無從下手。而穩(wěn)轉(zhuǎn)可作為穩(wěn)定的模型，進一步進行相關(guān)的實驗。

所以，到底穩(wěn)轉(zhuǎn)還是瞬轉(zhuǎn)需要根據(jù)實驗的需要，但是通常會同步進行，因為還沒開始怎么知道會不會出現(xiàn)互補、致死等等問題，如果不會且表型和瞬轉(zhuǎn)類似，那又多了一個重要的實驗模型，為后續(xù)實驗提供方便。

此外，你可以考慮構(gòu)建可誘導型穩(wěn)定細胞系，這個工具針對致死或互補等的蛋白，效果非常好

影響轉(zhuǎn)染的因素

要看你的目的，是做瞬時表達還是穩(wěn)定表達，做穩(wěn)定表達，為了更好的整合到細胞的基因組上，可將質(zhì)粒線性化，選擇好酶切位點。不酶切直接篩選穩(wěn)定表達也可以得到結(jié)果。293轉(zhuǎn)染效率還是較高的，一般不用穩(wěn)定篩選。瞬時轉(zhuǎn)染完全可以，如果是要以后做長期研究，觀察長時間的效應，就的考慮穩(wěn)定轉(zhuǎn)染

轉(zhuǎn)染是否成功的影響因素很多，如需要轉(zhuǎn)染的細胞類型（對于困難的細胞系尤其如此），需要被轉(zhuǎn)染的分子（DNA、RNA、寡核苷酸、蛋白質(zhì)），轉(zhuǎn)染試劑等。